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產(chǎn)品概述
腫瘤壞死因子-α(TNF-α)，又稱為惡液質(zhì)素（cachectin）；腫瘤壞死因子-β(TNF-β)，又稱為淋巴毒素，是兩種關(guān)聯(lián)性強的蛋白（約34%的氨基酸序列同源性），它們結(jié)合相同的細(xì)胞表面受體，并且有很多共同的生物學(xué)功能。TNF-α和TNF-β在正常宿主抵抗感染及惡性腫瘤的生長中起重要作用，作為免疫刺激和炎癥反應(yīng)的中介。TNFs的過量產(chǎn)生，則暗示了在很多的病理條件下起重要作用，包括惡疾，膿毒性的沖擊，自身免疫紊亂。TNF-α為有活性巨噬細(xì)胞和其它類型的細(xì)胞產(chǎn)生，這些細(xì)胞包括：T細(xì)胞和B細(xì)胞、NK細(xì)胞、LAK細(xì)胞、星性膠質(zhì)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和一些腫瘤細(xì)胞。鼠的TNF-αcDNA編碼235個氨基酸殘基的二型膜蛋白。具有156個氨基酸殘基的可溶TNF-α是被一個膜定TNF-αC端金屬蛋白酶水解作用釋放的。
產(chǎn)品原理
本實驗采用雙抗體夾心ELISA法?？剐∈骉NF-α單抗包被于酶標(biāo)板上，同時加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品和生物素化的抗小鼠TNF-α抗體，標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品中的TNF-α?xí)c加入于孔中的生物素化的抗小鼠TNF-α抗體及包被于酶標(biāo)板上的單抗結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去；加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素，親合素與生物素特異性結(jié)合，游離的成分被洗去。加入顯色底物（顯色劑），若反應(yīng)孔中有TNF-α，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑變藍(lán)，加終止液變黃。在450nm處測OD值，TNF-α濃度與OD450值之間呈正相關(guān)，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中TNF-α濃度。